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La aplicación no puede abrir la conexión SQL cuando está en IIS

Estás usando Trusted_Connection=True y por lo tanto el usuario ApplicationPoolIdentity o IIS APPPOOL\mysite se suministra al servidor SQL.

Opción 1. Dar permisos a IIS APPPOOL\mysite en el servidor SQL.

Opción 2. Usar User Id=User_Id;Password=****** en lugar de Trusted_Connection=True